Диплом, биотехнологии. 150 л.,1600р.
НТУУ КПИ - 2006. на украинском языке.

СПИСОК УМОВНИХ СКОРОЧЕНЬ ........................... 6
ВСТУП ....................... 7
РОЗДІЛ 1. ОГЛЯД ЛІТЕРАТУРИ .................................................................. 11
1.1. ПРИНЦИПИ, ОСОБЛИВОСТІ ТА ЗАСТОСУВАННЯ ГІБРИДОМНОЇ ТЕХНОЛОГІЇ...11
1.1.1. ПЕРЕДУМОВИ ТА ІСТОРІЯ СТВОРЕННЯ ГІБРИДОМНОЇ ТЕХНОЛОГІЇ ........... 11
1.1.2. ОСНОВНІ ПРИНЦИПИ ГІБРИДОМНОЇ ТЕХНОЛОГІЇ ....................................... 13
1.1.3. ОСОБЛИВОСТІ ГІБРИДОМНОЇ ТЕХНОЛОГІЇ ТА МОНОКЛОНАЛЬНИХ
АНТИТІЛ (МКАТ) .......................................... 20
1.1.4. ЗАСТОСУВАННЯ ГІБРИДОМ ТА МКАТ ...................................................... 22
1.2. МОНОКЛОНАЛЬНІ АНТИТІЛА ДО ІМУНОГЛОБУЛІНІВ ЛЮДИНИ ..................... 26
1.2.1. ОСОБЛИВОСТІ ТЕХНОЛОГІЇ ОДЕРЖАННЯ ................................................... 29
1.2.2. ОСНОВНІ СФЕРИ ЗАСТОСУВАННЯ .............................................................. 32
РОЗДІЛ 2. МАТЕРІАЛИ ТА ОСНОВНІ МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕНЬ ........... 38
2.1. МАТЕРІАЛИ ................. 38
2.1.1. ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНІ ТВАРИНИ ................................................................. 38
2.1.2. КУЛЬТУРА КЛІТИН ............................................ 38
2.1.3. СЕРЕДОВИЩА ТА РЕАКТИВИ ..................................................................... 38
2.1.4. ІМУНОФЕРМЕНТНІ ТЕСТ-СИСТЕМИ ........................................................... 39
2.1.5. ПАНЕЛІ СИРОВАТОК ТА КОНТРОЛІ ............................................................ 39
2.1.6. ОБЛАДНАННЯ ............................................................................................ 40
2.2. ОСНОВНІ МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕНЬ ........................... 41
2.2.1. МЕТОДИ ОДЕРЖАННЯ АНТИГЕНУ .............................................................. 41
2.2.2. ІМУНОЛОГІЧНІ МЕТОДИ ТА МЕТОДИ ГІБРИДОМНОЇ ТЕХНОЛОГІЇ ................ 43
2.2.3. МЕТОДИ ОДЕРЖАННЯ ІМУНОФЕРМЕНТНИХ КОН’ЮГАТІВ ......................... 49
2.2.4. МАТЕМАТИЧНІ МЕТОДИ ............................................................................ 50
РОЗДІЛ 3. ОДЕРЖАННЯ FС-ФРАГМЕНТІВ IGG ЛЮДИНИ ..................... 51
3.1. ФЕРМЕНТАТИВНИЙ ГІДРОЛІЗ IGG ЛЮДИНИ ................................................. 51
3.2. ОЧИСТКА ТА ВИДІЛЕННЯ FС-ФРАГМЕНТІВ IGG ЛЮДИНИ ............................. 53
РОЗДІЛ 4. ОДЕРЖАННЯ МКАТ ДО FС-ФРАГМЕНТІВ IGG ЛЮДИНИ .. 60
4.1. ОДЕРЖАННЯ ГІБРИДОМ ................................................................................ 60
4.2. ПОГЛИБЛЕНА ХАРАКТЕРИСТИКА МКАТ ..................................................... 65
4.2.1. ВИЗНАЧЕННЯ ТИТРУ У КУЛЬТУРАЛЬНІЙ РІДИНІ ......................................... 65
4.2.2. ВИЗНАЧЕННЯ КОНСТАНТИ АФІННОСТІ ..................................................... 66
4.2.3. ВИЗНАЧЕННЯ ІЗОТИПУ ............................ 69
4.3. НАКОПИЧЕННЯ ТА ОЧИСТКА МКАТ ........................................................... 72
5. ОДЕРЖАННЯ ІМУНОФЕРМЕНТНИХ КОНЮГАТІВ ТА ЇХ ХАРАКТЕРИСТИКА ........ 75
5.1. ХАРАКТЕРИСТИКА КОН’ЮГАТІВ У СКЛАДІ ТЕСТ-СИСТЕМ .............................76
5.1.1. ХАРАКТЕРИСТИКА КОН’ЮГАТІВ У ТЕСТ-СИСТЕМІ “DIA-HCV”............... 76
5.1.2. ХАРАКТЕРИСТИКА КОН’ЮГАТІВ У ТЕСТ-СИСТЕМІ “DIA-TREP”.............. 85
5.1.3. ХАРАКТЕРИСТИКА КОН’ЮГАТІВ У ТЕСТ-СИСТЕМІ “DIA-TOXO-IGG”..... 90
5.1.4. ХАРАКТЕРИСТИКА КОН’ЮГАТІВ У ТЕСТ-СИСТЕМІ
“DIA-RUBELLA-IGG” ………………………………...………………………. 94
5.1.5. ХАРАКТЕРИСТИКА КОН’ЮГАТІВ У ТЕСТ-СИСТЕМІ “DIA-CMV-IGG” ..... 97
5.2. БІОЛОГІЧНІ ВЛАСТИВОСТІ МКАТ ТА ЇХ ІМУНОФЕРМЕНТНИХ
КОН’ЮГАТІВ 101
РОЗДІЛ 6. ОБГОВОРЕННЯ РЕЗУЛЬТАТІВ ............................................... 106
ВИСНОВКИ .......................... 116
СПИСОК ВИКОРИСТАНИХ ДЖЕРЕЛ ...................................................... 117
ДОДАТОК А. ПРОПОЗИЦІЇ ЩОДО ЗМІН У ТЕХНОЛОГІЧНОМУ ПРОЦЕСІ НВК “ДІАПРОФ МЕД” ... 138
ДОДАТОК Б. АКТ ПРО ВПРОВАДЖЕННЯ .............................................. 139
ДОДАТОК В. РОЗРАХУНОК СОБІВАРТОСТІ ВИМКОНАННЯ НАУКОВО-ДОСЛІДНОЇ РОБОТИ .... 140


1. Теория и практика иммуноферментного анализа / А. М. Егоров, А. П. Осипов, Б. Б. Дзантиев, Е. М. Гаврилова – М.: Высш. шк., 1991. – 288с.
2. ДиаПроф Мед. Каталог продукции: 2003 – 2004. К.: АОЗТ НПК «ДиаПроф Мед», 2003. – 96 с.
3. Материалы 1-ой меджувародной научно-практической конференции «Специфическая диагностика инфекционных болезней» (20 – 21 января 2004 г., г. Киев) / Под ред. Е.Г. Бочкарева, Л.Л. Громашевской, А.Л. Гураля. – К.: АОЗТ НПК «ДиаПроф Мед», 2004. – 120 с.
4. Goding J. Monoсlonal antibodies. Principles and practice. – San Diego: Acedemic press, 1996. – 492 р.
5. Биотехнология. В 8 кн. / Под ред. Н.С.Егорова, В.Д.Самуилова Кн. 3. Клеточная инженерия. / Р.Г.Бутенко, М.В.Гусев, А.Ф.Киркин и др. – М.: Высш. шк, 1987. – 127 с.
6. Співак М. Я., Шинкаренко Л. М., Карпов О. В. Імунобіотехнологія – досягнення та перспективи // Імунологія та алергологія. – №4. – 2002. – С. 7 – 12.
7. Kohler G., Milstein C. Continuous cultures of fused cells secreting anti¬body of predefined specificity // Nature. – 1975. – Vol. 256. – P. 495 – 497.
8. Bazin H. Rat Hybridomas and Rat Monoclonal Antibodies. – Boca Raton: CRC Press, 1990. – P. 43 – 52.
9. Климович В. Б., Самойловим М. П., Крутецкая И. Ю. и др. Моноклональные антитела к подласам IgG человека: получение и исследование специфичности // Иммунология. – 1998. – №3. – С. 27 – 31.
10. Ledbetter J. A., Herzenberg L. A. Xenogeneic monoclonal antibodies to mouse lymphoid differentiation antigens // Immunol. Rev. – 1979. – Vol. 47. – P. 63 – 90.
11. Kincade P. W., Lee Sun, Watanabe T. Monoclonal rat antibodies to murine IgM determinants // J. Immunol. Methods. – 1981. – Vol. 42. – P. 17 – 26.
12. Dresser D. W. Specific inhibition of antibody production. II. Paralysis induced in adult mice by small quantities of antigen // Immunology. – 1962. – Vol. 5. – P. 378 – 388.
13. Handman E., Remington J. Serological and immunochemical characterisa¬tion of monoclonal antibodies to Toxoplasma gondii // Immunology. – 1980. – Vol. 40. – P. 579 – 588.
14. Johnson A. M., McNamara P. J., Neoh S. H. Hybridomas secreting monoclonal antibody to Toxoplasma gondii // Ausl. J. Exp. Biol. Mod. Sci. – 1981. – Vol.59. – P. 303 – 306.
15. Hudson L., Hay F. C. Practical Immunology. – Oxford: Blackwell, 1976. – 344 p.
16. Luben R. A., Mohler, M. A. In vitro immunization as an adjunct to the pro¬duction of hybridomas producing antibodies against the lymphokine osteoclast activating factor // Mol. Immunol. – 1980. – Vol. 17. – P. 635 – 639.
17. Luben R. A., Brazeau P., Bohlen P. Monoclonal antibodies to hypothalamic growth hormone–releasing factor with picomoles of antigen // Science. – 1982. – Vol. 218. – P. 887 – 889.
18. Caskey C. T., Kruh G. D. The HPRT locus // Cell. – 1979. – N 16. – P. 1 – 9.
19. Potter M. Immunoglobulin-producing tumors and myeloma proteins of mice // Physiol. Rev. – 1972. – Vol. 52. – P. 631 – 719.
20. Potter M., Boyce C. R. Induction of plasma cell neoplasms in strain BALB/c mice with mineral oil adjuvants // Nature. – 1962. – Vol. 193. – P. 1086 – 1087.
21. Warner N. L. Autoimmunity and the pathogenesis of plasma cell tumor induc¬tion in NZB inbred and hybrid mice // Immunogenetics. – 1975. – № 2. – Р. 1 – 20.
22. Horibata K., Harris A. W. Mouse myelomas and lymphomas in culture // Exp. Cell Res. – 1970. – Vol. 60. – P. 61 – 77.
23. Metcalf D. The serum factor stimulating colony formation in vitro by murine plasmacytoma cells: Response to antigens and mineral oil // J. Immunol. – 1974. – Vol. 113. – P. 235 – 243.
24. Bazin H., Lemieux R. Role of the macrophage-derived hybridoma growth factor in the in vitro and in vivo proliferation of newly formed B cell hybridomas // J. Immunol. – 1987. – Vol. 139. – P. 780 – 787.
25. Bazin H., Lemieux R. Increased proportion of B cell hybridomas secreting monoclonal antibodies of desired specificity in cultures containing macrophage-derived growth factor (IL-6) // J. Immunol. Methods. – 1989. – Vol. 116. – P. 245 – 249.
Всего 208 источников